Paldies, ka apmeklējāt Nature.com. Pārlūka versijai, kuru izmantojat, ir ierobežots CSS atbalsts. Lai iegūtu labākos rezultātus, mēs iesakām izmantot jaunāku pārlūkprogrammas versiju (vai atspējot saderības režīmu Internet Explorer). Pa to laiku, lai nodrošinātu pastāvīgu atbalstu, mēs parādām vietni bez stila vai JavaScript.
Mikrobu augšana brūcēs bieži izpaužas kā bioplēves, kas traucē dziedināšanu un ir grūti izskaust. Jauni sudraba mērces apgalvo, ka apkaro brūču infekcijas, taču to antibiofilmas efektivitāte un no infekcijas neatkarīgā dziedināšanas ietekme parasti nav zināma. Izmantojot Staphylococcus aureus un Pseudomonas aeruginosa in vitro un in vivo bioplēvju modeļus, mēs ziņojam par Ag1+ jonu ģenerējošu pārsēju efektivitāti; Ag1+ mērces, kas satur etilēndiamīnetetraetiķskābi un benzetonija hlorīdu (AG1+/EDTA/BC), un mērces, kas satur sudraba nitrātu (Ag Oxysalts). , kas ražo Ag1+, Ag2+ un Ag3+ jonus, lai apkarotu brūces bioplēvi un tās ietekmi uz dziedināšanu. Ag1+ mērcēm bija minimāla ietekme uz brūču bioplēvi in vitro un pelēm (C57BL/6J). Turpretī ar skābekli saistīti AG sāļi un AG1+/EDTA/BC pārsēju ievērojami samazināja dzīvotspējīgo baktēriju skaitu bioplēvēs in vitro un parādīja ievērojamu baktēriju un EPS komponentu samazināšanos peles brūču bioplēvēs. Šiem pārsējiem bija atšķirīga ietekme uz ar bioplēvi inficēto un bez biofilmu inficēto brūču dziedināšanu, un ar skābekli sāls mērcēm ir vairāk labvēlīga ietekme uz atkārtotu lietošanu, brūču lielumu un iekaisumu, salīdzinot ar kontroles procedūrām un citiem sudraba pārsēju. Dažādām sudraba mērču fizikāli ķīmiskajām īpašībām var būt atšķirīga ietekme uz brūču bioplēvi un dziedināšanu, un tas jāapsver, izvēloties pārsēju bioplēvi inficēto brūču ārstēšanai.
Hroniskas brūces tiek definētas kā “brūces, kas neizdodas progresēt normālos dziedināšanas posmos sakārtotā un savlaicīgā veidā” 1. Hroniskas brūces rada psiholoģisku, sociālu un ekonomisku slogu pacientiem un veselības aprūpes sistēmai. Tiek lēsts, ka ikgadējie NHS izdevumi brūču ārstēšanai un ar tām saistītajām blakusslimībām 2017. - 182. Hroniskas brūces šobrīd ir arī aktuāla problēma Amerikas Savienotajās Valstīs, un Medicare novērtē ikgadējās izmaksas, kas saistītas ar pacientu ārstēšanu ar brūcēm USD 28,1–196,8 miljardu USD 3 vērtībā.
Infekcija ir galvenais faktors, kas novērš brūču sadzīšanu. Infekcijas bieži izpaužas kā bioplēves, kas ir sastopamas 78% nedzīstošu hronisku brūču. Bioplēves veidojas, kad mikroorganismi kļūst neatgriezeniski piestiprināti pie virsmām, piemēram, brūču virsmām, un tie var agregāt, veidojot ārpusšūnu polimēru (EPS) ražojošas kopienas. Brūces bioplēve ir saistīta ar paaugstinātu iekaisuma reakciju, kas izraisa audu bojājumus, kas var aizkavēt vai novērst dziedināšanu4. Audu bojājumu palielināšanās daļēji var būt saistīta ar palielinātu matricas metalloproteināžu, kolagenāzes, elastāzes un reaktīvās skābekļa sugu5 aktivitātes aktivitāti. Turklāt iekaisuma šūnas un bioplēvi paši ir augsti skābekļa patērētāji, un tāpēc tie var izraisīt vietējās audu hipoksiju, noplicinot dzīvībai svarīgā skābekļa šūnas, kas vajadzīgas efektīvai audu atjaunošanai6.
Nobriedušas bioplēves ir ļoti izturīgas pret antibakteriāliem līdzekļiem, kurām ir nepieciešama agresīvas stratēģijas bioplēves infekciju kontrolei, piemēram, mehāniskai ārstēšanai, kam seko efektīva pretmikrobu ārstēšana. Tā kā bioplēves var ātri atjaunoties, efektīvi antibakteriālie līdzekļi var samazināt atkārtotās formas risku pēc ķirurģiskas Debridement7.
Sudrabu arvien vairāk izmanto pretmikrobu mērcēs, un to bieži izmanto kā pirmās līnijas ārstēšanu hroniskām inficētām brūcēm. Ir daudz komerciāli pieejamu sudraba mērces, no kurām katra satur atšķirīgu sudraba sastāvu, koncentrāciju un bāzes matricu. Sudraba aproces sasniegumi ir noveduši pie jaunu sudraba aproces attīstības. Sudraba metāla forma (AG0) ir inerta; Lai sasniegtu pretmikrobu efektivitāti, tam ir jāzaudē elektrons, veidojot jonu sudrabu (Ag1+). Tradicionālie sudraba mērces satur sudraba savienojumus vai metālisku sudrabu, kas, pakļaujoties šķidrumam, sadalās, veidojot Ag1+ jonus. Šie Ag1+ joni reaģē ar baktēriju šūnu, noņemot elektronus no strukturālajiem komponentiem vai kritiskiem procesiem, kas nepieciešami izdzīvošanai. Patentētā tehnoloģija ir izraisījusi jaunu sudraba savienojumu - Ag Oxysalts (sudraba nitrātu, Ag7no11), kas ir iekļauts brūču mērcēs. Atšķirībā no tradicionālās sudraba, skābekli saturošu sāļu sadalīšanās rada sudraba stāvokļus ar lielāku valenci (Ag1+, Ag2+un Ag3+). In vitro pētījumi parādīja, ka zema skābekļa sudraba sāļu koncentrācija ir efektīvāka nekā viena jonu sudraba (Ag1+) pret patogēnām baktērijām, piemēram, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus un Escherichia coli8,9. Citā jauna veida sudraba mērcē ietilpst papildu sastāvdaļas, proti, etilēndiamīnetetraetiķskābe (EDTA) un benzetonija hlorīds (BC), par kuriem tiek ziņots, ka tā ir paredzēta bioplēves EPS un tādējādi palielina sudraba iekļūšanu bioplēvē. Šīs jaunās sudraba tehnoloģijas piedāvā jaunus veidus, kā mērķēt uz brūcēm bioplēvēm. Tomēr šo antibakteriālo līdzekļu ietekme uz brūču vidi un no infekcijas neatkarīgu dziedināšanu ir svarīga, lai nodrošinātu, ka tie nerada nelabvēlīgu brūču vidi vai aizkavē dziedināšanu. Ir ziņots par bažām par sudraba citotoksicitāti in vitro ar vairākiem sudraba pārsēju1,11. Tomēr in vitro citotoksicitāte vēl nav pārveidota par in vivo toksicitāti, un vairāki Ag1+ mērces ir parādījuši labu drošības profilu12.
Šeit mēs izpētījām karboksimetilcelulozes mērces efektivitāti, kas satur jaunus sudraba formulējumus pret brūces bioplēvi in vitro un in vivo. Turklāt tika novērtēta šo pārsēju ietekme uz imūno reakciju un dziedināšanu neatkarīgi no infekcijas.
Visas izmantotās pārsēju bija komerciāli pieejamas. 3M Kerracel gēla šķiedru mērce (3M, Knutsford, UK) ir ne antiprobiāla 100% karboksimetilcelulozes (CMC) gēla šķiedras pārsēja, kas šajā pētījumā tika izmantota kā kontroles pārsēja. Tika novērtēti trīs pretmikrobu CMC sudraba mērces, proti, 3M Kerracel AG mērce (3M, Knutsford, UK), kurā ir 1,7 masas%. Oksigenēts sudraba sāls (Ag7nO11) augstākā valences sudraba jonos (Ag1+, Ag2+un Ag3+). Ag7nO11 sadalīšanās laikā Ag1+, Ag2+ un Ag3+ joni veidojas proporcijā 1: 2: 4. Aquacel AG papildu mērce, kas satur 1,2% sudraba hlorīda (Ag1+) (Convatec, Deeside, UK) 13 un Aquacel AG+papildu mērce, kas satur 1,2% sudraba hlorīda (AG1+), EDTA un benzetonija hlorīdu (konvatec, Deeside, UK) 14.
Šajā pētījumā izmantotie celmi bija Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Anglijas sabiedrības veselība, Solsberija) un Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Anglijas sabiedrības veselība, Solsberija).
Baktērijas tika audzētas uz nakti Mullera-Hintona buljonā (Oxoid, Altrincham, UK). The overnight culture was then diluted 1:100 in Mueller-Hinton broth and 200 µl plated onto sterile 0.2 µm Whatman cyclopore membranes (Whatman plc, Maidstone, UK) onto Mueller-Hinton agar plates (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent , Great Britain ). ) Koloniālā bioplēves veidošanās 37 ° C temperatūrā 24 stundas. Šīs koloniālās bioplēves tika pārbaudītas logaritmiskai saraušanās laikā.
Sagrieziet pārsēju 3 cm2 kvadrātveida gabaliņos un pirmsendentu ar sterilu dejonizētu ūdeni. Novietojiet pārsēju virs kolonijas bioplēves uz agara plāksnes. Katru 24 ha bioplēvi tika noņemti, un dzīvotspējīgas baktērijas bioplēvē (CFU/ml) tika kvantitatīvi noteiktas ar sērijveida atšķaidījumu (no 10–1 līdz 10–7) dienas leņķa neitralizācijas buljonā (Merck-Millipore). Pēc 24 stundu inkubācijas 37 ° C temperatūrā standarta plāksnes skaits tika veikts uz Muellera-Hintona agara plāksnēm. Katru ārstēšanu un laika punktu veica trīs eksemplāros, un plākšņu daudzumu atkārtoja katram atšķaidījumam.
Cūkgaļas vēdera āda tiek iegūta no sievietēm lielām baltām cūkām 15 minūšu laikā pēc kaušanas saskaņā ar Eiropas Savienības eksporta standartiem. Ādu noskūta un notīra ar spirta salvetēm, pēc tam 24 stundas sasaldēja -80 ° C temperatūrā, lai devitalizētu ādu. Pēc atkausēšanas 1 cm2 ādas gabaliņus trīs reizes mazgā ar PBS, 0,6% nātrija hipohlorīta un 70% etanola 20 minūtes katru reizi. Pirms epidermas noņemšanas noņemiet atlikušo etanolu, 3 reizes mazgājot sterilā PBS. Ādu kultivēja 6 iedobju plāksnē ar 0,45 μm biezu neilona membrānu (Merck-Millipore) virsū un 3 absorbējošiem spilventiņiem (Merck-Millipore), kas satur 3 ml augļa liellopu serumu (Sigma), kas papildināts ar 10% Dulbecco modificētu Ērglis. Vidējs (Dulbecco modificētais ērglis Media - Aldrich Ltd.).
Koloniālās bioplēves tika audzētas, kā aprakstīts bioplēves iedarbības pētījumos. Pēc bioplēves kultivēšanas uz membrānas 72 stundas, bioplēvi uzklāja uz ādas virsmas, izmantojot sterilu inokulācijas cilpu un membrāna tika noņemta. Pēc tam bioplēve tika inkubēta uz cūkas dermas vēl 24 stundas 37 ° C temperatūrā, lai bioplēvme varētu nobriest un ievērot cūkas ādu. Pēc bioplēves nogatavināšanas un piestiprināšanas 1,5 cm2 pārsēju, kas iepriekš bija molizēta ar sterilu destilētu ūdeni, tika uzklāta tieši uz ādas virsmas un 24 stundas inkubēta 37 ° C temperatūrā. Dzīvotās baktērijas tika vizualizētas, iekrāsojot, vienmērīgi piemērojot PrestoBlue šūnu dzīvotspējas reaģentu (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, Lielbritānija) katra eksplantācijas apikālajai virsmai un inkubēja to 5 minūtes. Izmantojiet Leica DFC425 digitālo kameru, lai uzreiz uzņemtu attēlus Leica MZ8 mikroskopā. Rous Crained Pink tika kvantitatīvi noteikts, izmantojot Image Pro programmatūras versiju 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (MediaCy.com)). Skenējošā elektronu mikroskopija tika veikta, kā aprakstīts zemāk.
Baktērijas, kas audzētas uz nakti, tika atšķaidītas 1: 100 Muellera-Hintona buljonā. Sterilai 0,2 μm Whatman Cyclopore membrānai (Whatman, Maidstone, Lielbritānija) tika pievienota 200 μl kultūras un pārklāta ar Muelleru-Hintona agaru. Bioplēves plāksnes 72 stundas inkubēja 37 ° C temperatūrā, lai varētu nobriedušas bioplēves veidošanās.
Pēc 3 dienu bioplēves nobriešanas 3 cm2 kvadrātveida pārsēja tika novietota tieši uz bioplēves un 24 stundas inkubēja 37 ° C temperatūrā. Pēc pārsēju noņemšanas no bioplēves virsmas 20 sekundes virsmai tika pievienots 1 ml prestoblue šūnu dzīvotspējas reaģents (Invitrogen, Waltham, MA) katras bioplēves virsmai. Virsmas tika žāvētas, pirms krāsu izmaiņas tika reģistrētas, izmantojot Nikon D2300 digitālo kameru (Nikon UK Ltd., Kingston, UK).
Sagatavojiet nakti kultūras uz Muellera-Hintona agara, pārnesiet atsevišķas kolonijas uz 10 ml Muellera-Hintona buljona un inkubē uz kratītāja 37 ° C temperatūrā (100 apgr./min.). Pēc nakti inkubācijas kultūra tika atšķaidīta 1: 100 Muellera-Hintona buljonā un 300 µL tika pamanīta uz 0,2 µm apļveida Whatman Cyclopore membrānas (Whatman International, Maidstone, Lielbritānija) uz Muellera-Hintona agara un inkubēta 37 ° C temperatūrā 72 stundu laikā 72 stundu laikā 72 stundu laikā 72 stundu laikā 72 stundu laikā Apvidū Apvidū Nobriedušā bioplēve tika piemērota brūcei, kā aprakstīts zemāk.
Visi darbi ar dzīvniekiem tika veikti Mančestras universitātē saskaņā ar projekta licenci, ko apstiprinājusi Dzīvnieku labturības un ētikas pārskata birojs (P8721BD27) un saskaņā ar vadlīnijām, ko Iekšlietu birojs publicēja saskaņā ar 2012. gada pārskatīto ASPA. Visi autori ievēroja ierašanās vadlīnijas. Astoņu nedēļu vecās C57BL/6J peles (Envigo, Oxon, UK) tika izmantotas visos in vivo pētījumos. Peles tika anestēzētas ar izoflurānu (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK), un to muguras virsmas tika skūtas un iztīrītas. Pēc tam katrai pelei tika piešķirta 2 × 6 mm eksisionāla brūce, izmantojot Stiefel biopsijas perforatoru (Schuco International, Hertfordšīra, Lielbritānija). Bioplēves inficētām brūcēm uz membrānas uzklājiet 72 stundu koloniālo bioplēvi, kā aprakstīts iepriekš, brūces dermas slānim, izmantojot sterilu inokulācijas cilpu tūlīt pēc traumas un izmetiet membrānu. Lai uzturētu mitru brūču vidi, ir iepriekš mēzīts viens kvadrātcentimetrs pārsējs. Mērces tika uzklātas tieši uz katru brūci un pārklāti ar 3M tegaderm plēvi (3M, Bracknell, UK) un mastisola šķidruma līmi (Doquest Healthcare, Ferndale, MI), kas uzklāti ap malām, lai nodrošinātu papildu saķeršanos. Buprenorfīns (AnimalCare, York, Lielbritānija) tika ievadīts ar pretsāpju līdzekļu koncentrāciju 0,1 mg/kg. Cull peles trīs dienas pēc traumas, izmantojot 1. saraksta metodi, un pēc vajadzības noņemiet, uz pusi uzkarsē un uzglabā brūces zonu.
Saskaņā ar ražotāja protokolu tika veikta hematoksilīna (ThermoFisher Scientific) un eozīna (ThermoFisher Scientific) krāsošana. Brūču zona un reepitelializācija tika kvantitatīvi noteikta, izmantojot Image Pro programmatūras versiju 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Audu sekcijas tika izraktas ksilolā (ThermoFisher Scientific, Loughborough, Lielbritānija), rehidrētas ar 100–50% gradētu etanolu un īsi iegremdētas dejonizētā ūdenī (ThermoFisher Scientific). Imunohistoķīmija tika veikta, izmantojot Vecastain Elite ABC PK-6104 komplektu (Vector Laboratories, Burlingame, CA) saskaņā ar ražotāja protokolu. Primārās antivielas pret neitrofiliem NIMP-R14 (ThermoFisher Scientific) un makrofāgi MS CD107B Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) tika atšķaidītas 1: 100 bloķējošā šķīdumā un pievienota griezuma virsmai, kam sekoja 2 anti-anti-, vektasteāna ABC un Vector Nova Red Peroxidase (HRP) substrāta komplekts (Vector Laboratories, Burlingame, CA) un apzīmēts ar hematoksilīnu. Attēli tika iegūti, izmantojot Olympus BX43 mikroskopu un Olympus DP73 digitālo kameru (Olympus, Southend-on-Sea, Lielbritānija).
Ādas paraugi tika fiksēti 2,5% glutaraldehīdā un 4% formaldehīda 0,1 M HEPES (pH 7,4) 24 stundas 4 ° C temperatūrā. Paraugi tika dehidrēti, izmantojot klasificētu etanolu, un žāvēti CO2, izmantojot Quorum K850 kritiskā punkta žāvētāju (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK), un sprādzienbj kā ar zelta-palādija sakausējumu, izmantojot kvorum SC7620 mini sputterer/mirdzuma izlādes sistēmu. Paraugi tika attēloti, izmantojot FEI Quanta 250 skenējošo elektronu mikroskopu (ThermoFisher Scientific), lai vizualizētu brūces centrālo punktu.
Toto-1 jodīds (2 μM) tika uzklāts uz izgrieztu peles brūces virsmu un inkubēts 5 minūtes 37 ° C temperatūrā (ThermoFisher Scientific) un apstrādāts ar SYTO-60 (10 μM) 37 ° C temperatūrā (ThermoFisher Scientific). 15 minūšu Z-Stack attēli tika izveidoti, izmantojot Leica TCS SP8.
Bioloģiskie un tehniskie replikācijas dati tika tabulēti un analizēti, izmantojot programmatūru GraphPad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). Lai pārbaudītu atšķirības starp katru ārstēšanu un ne antimikrobiālo kontroles pārsēju, tika izmantota vienvirziena dispersijas analīze ar vairākiem salīdzinājumiem, izmantojot Dunnett post hoc testu. P vērtība <0,05 tika uzskatīta par nozīmīgu.
Sudraba gēla šķiedru pārsēju efektivitāte vispirms tika novērtēta pret Staphylococcus aureus un Pseudomonas aeruginosa bioplēves kolonijām in vitro. Sudraba mērces satur dažādas sudraba formulas: tradicionālās sudraba mērces ražo Ag1+ jonus; Sudraba mērces, kas pēc EDTA/BC pievienošanas var radīt Ag1+ jonus, var iznīcināt bioplēves matricu un pakļaut baktērijas sudrabam ar sudraba antibakteriālo efektu. Joni15 un mērces, kas satur skābekli, Ag sāļi, kas ražo Ag1+, Ag2+ un Ag3+ jonus. Tās efektivitāte tika salīdzināta ar antiprobiālo kontroles pārsēju, kas izgatavota no želētām šķiedrām. Atlikušās dzīvotspējīgās baktērijas bioplēvē tika novērtētas ik pēc 24 stundām 8 dienas (1. attēls). 5. dienā bioplēve tika noskaidrota ar 3,85 × 105s. Staphylococcus aureus vai 1,22 × 105p. aeruginosa, lai novērtētu bioplēves atjaunošanos. Salīdzinot ar antiprobiālo kontroles pārsējus, Ag1+ mērcēm bija minimāla ietekme uz baktēriju dzīvotspēju Staphylococcus aureus un Pseudomonas aeruginosa bioplēvēs 5 dienu laikā. Turpretī pārsējus, kas satur skābekli AG un AG1 + + EDTA/BC sāļus, 5 dienu laikā bija efektīvas baktēriju nogalināšanā bioplēves laikā. Pēc atkārtotas inokulācijas ar planktoniskajām baktērijām 5. dienā bioplēves atjaunošana netika novērota (1. att.).
Dzīvotspējīgu baktēriju kvantitatīvā noteikšana Staphylococcus aureus un Pseudomonas aeruginosa bioplēvēs pēc apstrādes ar sudraba mērcēm. Staphylococcus aureus un Pseudomonas aeruginosa bioplēves kolonijas tika apstrādātas ar sudraba mērcēm vai bez antiimikrobiālas kontroles mērces, un dzīvotspējīgo baktēriju skaits tika noteikts ik pēc 24 stundām. Pēc 5 dienām bioplēve tika noskaidrota ar 3,85 × 105s. Staphylococcus aureus vai 1,22 × 105p. Bacterioplanktona Pseudomonas aeruginosa kolonijas tika izveidotas individuāli, lai novērtētu bioplēves atjaunošanos. Grafiki parāda vidējo +/- standarta kļūdu.
Lai vizualizētu sudraba mērces ietekmi uz bioplēvi dzīvotspēju, pārsējus tika uzklātas uz nobriedušām bioplēvēm, kas audzētas uz cūku ādas ex vivo. Pēc 24 stundām mērci noņem un bioplēvi iekrāso ar zilu reaktīvo krāsu, kuru dzīvās baktērijas metabolizē rozā krāsā. Bioplēves, kas apstrādātas ar vadības mērcēm, bija rozā, kas norāda uz dzīvotspējīgu baktēriju klātbūtni bioplēvē (2.A attēls). Turpretī bioplēve, kas apstrādāta ar Ag oksizolu pārsēju, galvenokārt bija zila, norādot, ka atlikušās baktērijas uz cūkas ādas virsmas bija bez dzīvotspējīgas baktērijas (2.B attēls). Sajauktā zilā un rozā krāsā tika novērota bioplēvēs, kas apstrādātas ar Ag1+ saturošiem pārsējiem, kas norāda uz dzīvotspējīgu un nedzīvojamu baktēriju klātbūtni bioplēvē (2.C attēls), turpretī EDTA/BC pārsēju, kas satur Ag1+, galvenokārt bija zili ar dažiem rozā plankumiem. norāda apgabalus, kurus neietekmē sudraba pārsēja (2.d attēls). Aktīvo (rozā) un neaktīvo (zilo) zonu kvantitatīvā noteikšana parādīja, ka vadības plāksteris bija 75% aktīvs (2.e attēls). Ag1 + + EDTA/BC pārsējus, kas veikti līdzīgi kā skābeklis AG sāls mērces ar izdzīvošanas rādītājiem attiecīgi 13% un 14%. Ag1+ mērce arī samazināja baktēriju dzīvotspēju par 21%. Pēc tam šīs bioplēves tika novērotas, izmantojot skenējošo elektronu mikroskopiju (SEM). Pēc ārstēšanas ar kontroles pārsēju un Ag1+ mērci tika novērots Pseudomonas aeruginosa slānis, kas aptvēra cūku ādu (attēls 2F, H), turpretī pēc apstrādes ar Ag1+ mērci tika atrasti maz baktēriju šūnu un zemāk tika atrastas dažas baktēriju šūnas. Kolagēna šķiedras var uzskatīt par cūku ādas audu struktūru (2.g attēls). Pēc ārstēšanas ar Ag1 + + EDTA/BC mērci bija redzamas baktēriju plāksnes un pamatā esošās kolagēna šķiedras plāksnes (2.I attēls).
Pseudomonas aeruginosa bioplēves vizualizācija pēc sudraba ģērbšanās apstrādes. (A-D) Baktēriju dzīvotspēja Pseudomonas aeruginosa bioplēvēs, kas audzētas uz cūku ādas, tika vizualizētas, izmantojot Prestoblue dzīvotspējas krāsvielu 24 stundas pēc apstrādes ar sudraba mērcēm vai ne antiprobiālo kontroles pārsēju. Dzīvas baktērijas ir rozā, nedzīvojamas baktērijas un cūku āda ir zila. (E) Pseudomonas aeruginosa bioplēvju kvantitatīvā noteikšana uz cūku ādas (rozā plankuma), izmantojot skenējošu elektronu mikroskopijas attēlu Pro 10. versiju (FI), un apstrādātas ar sudraba pārsēju vai neinimikrobu kontroles pārsēju 24 stundas. SEM skala josla = 5 µm. (J - M) Koloniālās bioplēves pieauga uz filtriem un pēc 24 stundu inkubācijas ar sudraba mērcēm tika iekrāsotas ar prestoblue reaktīvo krāsu.
Lai noteiktu, vai ciešs saskare starp pārsēju un bioplēvēm ietekmē pārsēju efektivitāti, koloniālās bioplēves, kas novietotas uz līdzenas virsmas, 24 stundas apstrādāja ar pārsējus un pēc tam iekrāsotas ar reaktīvām krāsvielām. Neārstēta bioplēve bija tumši rozā krāsā (2.j attēls). Pretstatā bioplēvēm, kas apstrādātas ar mērcēm, kas satur skābekli, Ag sāļi (2.K attēls), bioplēves, kas apstrādātas ar pārsējiem, kas satur Ag1+ vai Ag1++ EDTA/BC, parādīja rozā krāsošanas joslas (2.L, M attēls). Šī rozā krāsa norāda uz dzīvotspējīgu baktēriju klātbūtni un ir saistīta ar šuves zonu mērcē. Šīs iešūtās vietas rada mirušas vietas, kas baktērijām ļauj izdzīvot.
Lai novērtētu sudraba pārsēju efektivitāti in vivo, pilna biezuma izgrieztas peļu brūces, kas inficētas ar nobriedušu S. aureus un P. aeruginosa bioplēvēm, tika apstrādātas ar neantimikrobiālas kontroles pārsēju vai sudraba mērces. Pēc 3 dienu ilgas ārstēšanas makroskopiskā attēla analīze parādīja mazāku brūču izmēru, apstrādājot ar skābekli sāls mērcēm, salīdzinot ar antimikrobu kontroles pārsējiem un citām sudraba mērcēm (3.A-H attēls). Lai apstiprinātu šos novērojumus, tika novāktas brūces un brūču laukums, un repitelializācija tika kvantitatīvi noteikta uz hematoksilīna un eozīna krāsotām audu sekcijām, izmantojot Image Pro programmatūras versiju 10 (3.I. attēls).
Sudraba pārsēju ietekme uz brūces virsmas un ar bioplēvēm inficēto brūču atkārtotu epitelializāciju. (A - H) Mazas šūnas, kas inficētas ar Pseudomonas aeruginosa (A - D) un Staphylococcus aureus (E - H) bioplēvēm pēc trim dienām ilgas ārstēšanas ar neantimikrobiālas kontroles pārsēju, skābekli, ar skābekli Ag sāls mērci, Ag1+ mērci un AG1+ ģērbšanās. Reprezentatīvi makroskopiski attēli. Peļu brūces ar Ag1 + + EDTA/BC mērci. (IL) reprezentatīva Pseudomonas aeruginosa infekcija, histoloģiskās sekcijas, kas iekrāsotas ar hematoksilīnu un eozīnu, izmanto, lai kvantitatīvi noteiktu brūču laukumu un epitēlija reģenerāciju. Brūču zonas (M, O) un procentuālā repitelializācijas (n, p) procentuālā noteikšana, kas inficēta ar Pseudomonas aeruginosa (M, N) un Staphylococcus aureus (O, P) bioplēvēm (katrai ārstēšanas grupai n = 12). Grafiki parāda vidējo +/- standarta kļūdu. * nozīmē p = <0,05 ** nozīmē p = <0,01; Makroskopiskā skala = 2,5 mm, histoloģiskā skala = 500 µm.
Brūču laukuma kvantitatīvā noteikšana brūcēs, kas inficētas ar Pseudomonas aeruginosa bioplēvi (3M attēls), parādīja, ka brūcēm, kas apstrādātas ar Ag Oxyysalts patiess. sasniedza statistisko nozīmīgumu (3M attēls). P = 0,423). Brūces, kas apstrādātas ar Ag1+ vai Ag1++ EDTA/BC, neliecināja par brūču laukumu (attiecīgi 3,1 mm2 un 3,6 mm2). Ārstēšana ar skābekli AG sāls mērci veicināja atkārtotu epitelializāciju lielākā mērā nekā attiecīgi antiprobiālā kontroles pārsēja (attiecīgi 34% un 15%; P = 0,029) un Ag1+ vai Ag1++ EDTA/BC (10% un 11%) ( 3.n attēls). Apvidū , attiecīgi).
Līdzīgas tendences brūču apgabalā un epitēlija reģenerācija tika novērotas brūcēs, kas inficētas ar S. aureus bioplēvēm (3o attēls). Mērķi, kas satur skābekli saturošus sudraba sāļus, samazināja brūces laukumu (2,0 mm2) par 23%, salīdzinot ar kontroles ne antimikrobiālo pārsēju (2,6 mm2), lai gan šis samazinājums nebija nozīmīgs (p = 0,304) (3.o attēls). Turklāt brūces laukums AG1+ ārstēšanas grupā tika nedaudz samazināts (2,4 mm2), savukārt brūce, kas apstrādāta ar Ag1++ EDTA/BC pārsēju, nesamazināja brūces laukumu (2,9 mm2). AG skābekļa sāļi arī veicināja brūču atkārtotu epitelializāciju ar S. aureus bioplēvi (31%) lielākā mērā nekā tie, kas apstrādāti ar ne antiprobiālu kontroles pārsēju (12%, p = 0,003) (3. attēls). Ag1+ mērce (16%, P = 0,903) un Ag+ 1+ EDTA/BC pārsēja (14%, P = 0,965) parādīja epitēlija reģenerācijas līmeni, kas līdzīgs kontrolei.
Lai vizualizētu sudraba mērču ietekmi uz bioplēves matricu, tika veikta TOTO 1 un SYTO 60 jodīda krāsošana (4. att.). TOTO 1 jodīds ir šūnu neiespējama krāsa, ko var izmantot, lai precīzi vizualizētu ārpusšūnu nukleīnskābes, kuras ir bagātīgas bioplēvju EPS. SYTO 60 ir šūnu caurlaidīga krāsa, ko izmanto kā pretstatu16. Toto 1 un SYTO 60 jodīda novērojumi brūcēs, kas inokulētas ar Pseudomonas aeruginosa bioplēvēm (4.a-D attēls) un Staphylococcus aureus (4.I-l attēls), parādīja, ka pēc 3 dienām ģērbšanās ārstēšanas EPS biofilmā ir ievērojami samazināta. satur skābekli sāļus AG un AG1 + + EDTA/BC. Ag1+ mērces bez papildu antibiofilmas komponentiem ievērojami samazināja DNS bez šūnām brūcēs, kas inokulētas ar Pseudomonas aeruginosa, bet bija mazāk efektīvas brūcēs, kas inokulētas ar Staphylococcus aureus.
In vivo brūču bioplēves attēlveidošana pēc 3 dienu ārstēšanas ar kontroli vai sudraba mērci. Pseudomonas aeruginosa (A - D) un Staphylococcus aureus (I - L) konfokālie attēli, kas iekrāsoti ar TOTO 1 (zaļi), lai vizualizētu ārpusšūnu nukleīnskābes, kas ir ārpusšūnu biofilmas polimēru sastāvdaļa. Lai krāsotu intracelulārās nukleīnskābes, izmantojiet SYTO 60 (sarkanu). skābes. P. skenējošā brūču elektronu mikroskopija, kas inficēta ar Pseudomonas aeruginosa (E - H) un Staphylococcus aureus (M - P) bioplēvēm pēc 3 dienām ilgas ārstēšanas ar kontroli un sudraba pārsējiem. SEM skala josla = 5 µm. Konfokālās attēlveidošanas skalas josla = 50 µm.
Skenējošā elektronu mikroskopija parādīja, ka peles, kas inokulētas ar Pseudomonas aeruginosa (4.e-H attēls) un Staphylococcus aureus (4M-P attēls) bioplēves kolonijām, bija ievērojami mazāk baktēriju pēc 3 dienu ārstēšanas ar visām sudraba pārsēju.
Lai novērtētu sudraba pārsēju ietekmi uz brūču iekaisumu pelēm ar bioplēvi, bioplēvē inficēto brūču sekcijas, kas 3 dienas apstrādātas ar kontroli vai sudraba mērcēm, bija imūnhistoķīmiski iekrāsotas, izmantojot antivielas, kas specifiskas neitrofiliem un makrofāgiem. Neitrofilu un makrofāgu kvantitatīva noteikšana iekšēji. Granulācijas audi. 5. attēls). Visas sudraba mērces samazināja neitrofilu un makrofāgu skaitu brūcēs, kas inficētas ar Pseudomonas aeruginosa, salīdzinot ar neinimikrobu kontroles mērcēm pēc trīs dienu ilgas ārstēšanas. Tomēr apstrāde ar skābekli sudraba sāls pārsēju izraisīja lielāku neitrofilu (p = <0,0001) un makrofāgu (p = <0,0001) samazināšanos, salīdzinot ar citām pārbaudītajām sudraba mērcēm (5.I attēls, j). Lai arī Ag1++ EDTA/BC lielāka ietekme uz brūces bioplēvi, tā samazināja neitrofilu un makrofāgu līmeni mazākā mērā nekā Ag1+ mērce. Mērenas brūces, kas inficētas ar S. aureus bioplēvi, tika novērotas arī pēc mērces ar Ag (P = <0,0001), Ag1+ (P = 0,0008) un Ag1 ++ EDTA/BC (P = 0,0043) oksisoliem, salīdzinot ar kontroli. Līdzīgas tendences tiek novērotas neitropēnijai. pārsējs (5.K attēls). Tomēr tikai skābekļa apjoma AG sāls pārmērība uzrādīja ievērojamu makrofāgu skaita samazināšanos granulācijas audos, salīdzinot ar kontroli ar brūcēm, kas inficētas ar S. aureus bioplēvēm (p = 0,0339) (5.L attēls).
Neitrofīli un makrofāgi tika kvantitatīvi noteikti brūcēs, kas inficētas ar Pseudomonas aeruginosa un Staphylococcus aureus bioplēvēm pēc 3 dienām ilgas ārstēšanas ar ne antimikrobiālu kontroli vai sudraba pārsēju. Neitrofīli (AD) un makrofāgi (EH) tika kvantitatīvi noteikti audu sekcijās, kas iekrāsotas ar antivielām, kas raksturīgas neitrofiliem vai makrofāgiem. Neitrofilu (I un K) un makrofāgu (J un L) kvantitatīvā noteikšana brūcēs, kas inficētas ar Pseudomonas aeruginosa (I un J) un Staphylococcus aureus (K&L) bioplēvēm. N = 12 katrā grupā. Grafiki parāda vidējo +/- standarta kļūdu, nozīmīguma vērtības, salīdzinot ar antibaktēriju kontroles pārsēju, * vidējais p = <0,05, ** vidējais p = <0,01; *** nozīmē p = <0,001; norāda p = <0,0001).
Pēc tam mēs novērtējām sudraba pārsēju ietekmi uz no infekcijas neatkarīgu dziedināšanu. Ar neinficētām ekskluzīvām brūcēm apstrādāja ar antiimikrobiālu vadības pārsēju vai sudraba mērci 3 dienas (6. attēls). Starp pārbaudītajām sudraba pārsēju, tikai ar skābekļa saturu sāls pārsēju, kas apstrādāti ar skābekli, makroskopiskos attēlos bija mazāki nekā brūces, kas apstrādātas ar kontroli (6.a-D attēls). Brūču laukuma kvantitatīvā noteikšana, izmantojot histoloģisko analīzi, parādīja, ka vidējais brūču laukums pēc apstrādes ar Ag oksizolu pārsēju bija 2,35 mm2, salīdzinot ar 2,96 mm2 brūcēm, kas apstrādātas ar kontroles grupu, bet šī atšķirība nesasniedza statistisko nozīmīgumu (P = 0,488) (att. . Turpretī brūču laukuma samazinājums netika novērots pēc apstrādes ar Ag1+ (3,38 mm2, p = 0,757) vai Ag1++ EDTA/BC (4,18 mm2, p = 0,054) pārsēju, salīdzinot ar kontroles grupu. Palielināta epitēlija reģenerācija tika novērota ar AG Oxysol mērci, salīdzinot ar kontroles grupu (attiecīgi 30% pret 22%), lai gan tas nesasniedza nozīmīgumu (P = 0,067), tas ir diezgan nozīmīgi un apstiprina iepriekšējos rezultātus. Mērce ar oksisoliem veicina atkārtotu epitelializāciju. Neinficēto brūču17 epitelizācija17. Turpretī ārstēšanai ar Ag1+ vai Ag1++ EDTA/BC mērcēm nebija ietekmes vai arī uzrādīja samazinātu atkārtotu epitelializāciju salīdzinājumā ar kontroli.
Sudraba brūču mērces ietekme uz brūču sadzīšanu neinficētām pelēm ar pilnīgu rezekciju. (AD) Reprezentatīvi makroskopiski brūču attēli pēc trīs dienu ilgas ārstēšanas ar ne antiimikrobiālu vadības pārsēju un sudraba mērci. (EH) reprezentatīvas brūču sekcijas, kas iekrāsotas ar hematoksilīnu un eozīnu. Brūču laukuma (I) kvantitatīvā noteikšana un reepitelializācijas procentuālais daudzums (J) tika aprēķināts no histoloģiskām sekcijām brūces viduspunktā, izmantojot attēlu analīzes programmatūru (n = 11–12 vienai ārstēšanas grupai). Grafiki parāda vidējo +/- standarta kļūdu. * nozīmē p = <0,05.
Sudrabam ir sena lietošanas vēsture kā pretmikrobu terapija brūču sadzīšanā, bet daudzās dažādas preparātas un piegādes metodes var izraisīt atšķirības pretmikrobu efektivitātē 18. Turklāt īpašu sudraba piegādes sistēmu antibiofilmas īpašības nav pilnībā izprotamas. Lai arī saimnieka imūno reakcija ir samērā efektīva pret planktoniskajām baktērijām, tā parasti ir mazāk efektīva pret bioplēvēm19. Planktoniskās baktērijas ir viegli fagocitizētas ar makrofāgiem, bet bioplēvēs agregētās šūnas rada papildu problēmas, ierobežojot saimnieka reakciju uz to, ka imūnās šūnas var iziet apoptozi un atbrīvot proinflammatīvus faktorus, lai uzlabotu imūno reakciju20. Tika novērots, ka daži leikocīti var iekļūt BiopoLms21, bet nespēj fagocitozes baktērijas, kad šī aizsardzība ir apdraudēta22. Lai atbalstītu saimnieka imūno reakciju pret brūču bioplēves infekciju, jāizmanto holistiska pieeja. Brūču atdalīšana var fiziski izjaukt bioplēvi un noņemt lielāko daļu bioburdenes, bet saimnieka imūno reakcija var būt neefektīva pret atlikušo bioplēvi, it īpaši, ja saimnieka imūno reakcija ir apdraudēta. Tādējādi pretmikrobu terapijas, piemēram, sudraba mērces, var atbalstīt saimnieka imūno reakciju un novērst bioplēves infekcijas. Kompozīcija, koncentrācija, šķīdība un piegādes substrāts var ietekmēt sudraba antibakteriālo efektivitāti. Pēdējos gados sudraba apstrādes tehnoloģijas sasniegumi ir padarījuši šos pārsēju efektīvākus 9,23. Tā kā sudraba ģērbšanās tehnoloģija attīstās, ir svarīgi izprast šo pārsēju efektivitāti, kontrolējot brūču infekciju, un, vēl svarīgāk, šo spēcīgo sudraba formu ietekmi uz brūču vidi un dziedināšanu.
Šajā pētījumā mēs salīdzinājām divu progresīvu sudraba mērces efektivitāti ar parastajiem sudraba mērces, kas ražo Ag1+ jonus pret bioplēvēm, izmantojot dažādus in vitro un in vivo modeļus. Mēs arī novērtējām šo pārsēju ietekmi uz brūču vidi un no infekcijas neatkarīgu dziedināšanu. Lai samazinātu piegādes matricas ietekmi, visas pārbaudītās sudraba mērces sastāvēja no karboksimetilcelulozes.
Mūsu sākotnējais novērtējums par šiem sudraba pārsēju pret Pseudomonas aeruginosa un Staphylococcus aureus koloniālajām bioplēvēm liecina, ka atšķirībā no tradicionālajām Ag1+ mērcēm divi uzlaboti sudraba mērces, Ag1++ EDTA/BC un skābekļa sāļi ir efektīvi 5. dažas dienas. Turklāt šie pārsējus novērš bioplēves atkārtotu veidošanos, atkārtojot planktonisko baktēriju iedarbību. Ag1+ mērcē bija sudraba hlorīds, tas pats sudraba savienojums un bāzes matrica kā Ag1++ EDTA/BC, un tajā pašā laika posmā bija ierobežota ietekme uz baktēriju dzīvotspēju bioplēve. Novērojums, ka Ag1++ EDTA/BC pārsējs bija efektīvāks pret bioplēvi nekā Ag1+ pārsējs, kas sastāv no vienas un tās pašas matricas, un sudraba savienojums atbalsta priekšstatu, ka ir vajadzīgas papildu sastāvdaļas, lai palielinātu sudraba hlorīda efektivitāti pret bioplēvi, kā ziņots, kā ziņots Citur15. Šie rezultāti apstiprina ideju, ka BC un EDTA ir papildu loma, kas veicina vispārējo ģērbšanās efektivitāti un ka šī komponenta neesamība AG1+ pārsēju, iespējams, ir veicinājusi nespēju pierādīt in vitro efektivitāti. Mēs noskaidrojām, ka ar skābekli saistītas AG sāls mērces, kas ražo Ag2+ un Ag3+ jonus, bija spēcīgāka antibakteriālā efektivitāte nekā Ag1+ un līmeņos, kas līdzīgi AG1++ EDTA/BC. Tomēr lielā redoksa potenciāla dēļ nav skaidrs, cik ilgi Ag3+ joni paliek aktīvi un efektīvi pret brūču bioplēvēm, un tāpēc ir jāpēta turpmāk. Turklāt ir daudz dažādu pārsēju, kas ģenerē Ag1+ jonus, kas šajā pētījumā netika pārbaudīti. Šīs pārsēju sastāvā ir dažādi sudraba savienojumi, koncentrācijas un bāzes matricas, kas var ietekmēt Ag1+ jonu piegādi un to efektivitāti pret bioplēvēm. Ir arī vērts atzīmēt, ka ir daudz dažādu in vitro un in vivo modeļu, ko izmanto, lai novērtētu brūču pārsēju efektivitāti pret bioplēvēm. Izmantotā modeļa veids, kā arī šajos modeļos izmantotais barotnes sāls un olbaltumvielu saturs ietekmēs pārsēju efektivitāti. Savā in vivo modelī mēs ļāvām bioplēvei nobriest in vitro un pēc tam to pārnest uz brūces dermas virsmu. Saimnieka peles imūno reakcija ir samērā efektīva pret planktoniskajām baktērijām, kas tiek izmantotas brūcei, tādējādi veidojot bioplēvi, kad brūce dziedē. Nobriedušas bioplēves pievienošana brūcei ierobežo saimnieka imūnās reakcijas uz bioplēves veidošanos efektivitāti, ļaujot nobriedušai bioplēvei sevi nodibināt brūcē, pirms var sākties dziedināšana. Tādējādi mūsu modelis ļauj mums novērtēt pretmikrobu pārsēju efektivitāti uz nobriedušām bioplēvēm, pirms brūces sāk dziedēt.
Mēs arī noskaidrojām, ka garša piemērotība ietekmē sudraba pārsēju efektivitāti uz in vitro audzētām bioplēvēm un cūku ādu. Ciešs kontakts ar brūci tiek uzskatīts par kritisku mērces pretmikrobu efektivitātei24,25. Mērķi, kas satur skābekli, AG sāļi bija ciešā saskarē ar nobriedušām bioplēvēm, kā rezultātā pēc 24 stundām ievērojami samazinājās dzīvotspējīgo baktēriju skaits bioplēvē. Turpretī, apstrādājot ar Ag1+ un Ag1++ EDTA/BC mērcēm, joprojām bija ievērojams skaits dzīvotspējīgu baktēriju. Šajos pārsējus satur šuves visā mērces garumā, kas rada mirušas vietas, kas novērš ciešu saskari ar bioplēvi. Mūsu in vitro pētījumos šie bezkontakta apgabali neļāva nogalināt dzīvotspējīgas baktērijas bioplēvē. Mēs novērtējām baktēriju dzīvotspēju tikai pēc 24 stundu ilgas ārstēšanas; Laika gaitā, kad pārsēja kļūst piesātinātāka, var būt mazāk mirušas vietas, samazinot šo dzīvotspējīgo baktēriju teritoriju. Tomēr tas uzsver mērces sastāva nozīmi, ne tikai sudraba veidu mērcē.
Kaut arī in vitro pētījumi ir noderīgi, lai salīdzinātu dažādu sudraba tehnoloģiju efektivitāti, ir svarīgi arī izprast šo pārsēju ietekmi uz bioplēvēm in vivo, kur saimnieka audi un imūno reakcija veicina mērces efektivitāti pret bioplēves. Šo pārsēju ietekme uz brūču bioplēvēm tika novērota, izmantojot skenējošu elektronu mikroskopiju un bioplēves krāsošanu EPS, izmantojot intracelulāras un ārpusšūnu DNS krāsvielas. Mēs noskaidrojām, ka pēc 3 dienu ilgas ārstēšanas visi pārsēji bija efektīvi, lai samazinātu bez šūnām DNS ar bioplēvi inficētās brūcēs, bet Ag1+ mērce bija mazāk efektīva Staphylococcus aureus inficētajās brūcēs. Skenējošā elektronu mikroskopija arī parādīja, ka ievērojami mazāk baktēriju bija brūcēs, kas apstrādātas ar sudraba mērcēm, lai gan tas bija vairāk izteikts ar skābekļa saturu AG sāls mērci un AG1++ EDTA/BC pārsēju, salīdzinot ar Ag1+ mērci. Šie dati rāda, ka pārbaudītajiem sudraba mērcēm bija atšķirīga ietekme uz bioplēves struktūru, taču neviena no sudraba mērcēm nespēja izskaust bioplēvi, atbalstot nepieciešamību pēc holistiskas pieejas brūču bioplēves infekciju ārstēšanai; Sudraba aproces izmantošana. Pirms ārstēšanas notiek fiziska atdalīšana, lai noņemtu lielāko daļu bioplēves.
Hroniskas brūces bieži atrodas smaga iekaisuma stāvoklī, un liekā iekaisuma šūnu ilgstoši paliek brūču audos, izraisot audu bojājumus un noplicinot skābekli, kas nepieciešams efektīvam šūnu metabolismam un funkcijai brūce26. Bioplēves saasina šo naidīgo brūču vidi, negatīvi ietekmējot dziedināšanu dažādos veidos, ieskaitot šūnu proliferācijas un migrācijas kavēšanu un proinflammatīvo citokīnu aktivizēšanu27. Tā kā sudraba mērces kļūst efektīvākas, ir svarīgi izprast to ietekmi uz brūču vidi un dziedināšanu.
Interesanti, ka, kaut arī visi sudraba mērces ietekmēja bioplēves sastāvu, tikai ar skābekli sudraba sāls mērces palielināja šo inficēto brūču atkārtotu epitelializāciju. Šie dati atbalsta mūsu iepriekšējos atklājumus17 un Kalan et al. (2017) 28, kas demonstrēja labu skābekļa sudraba sāļu drošības un toksicitātes profilus, jo zemāka sudraba koncentrācija bija efektīva pret bioplēvēm.
Mūsu pašreizējais pētījums izceļ sudraba tehnoloģijas atšķirības starp antibakteriālo sudraba mērci un šīs tehnoloģijas ietekmi uz brūču vidi un no infekcijas neatkarīgu dziedināšanu. Tomēr šie rezultāti atšķiras no iepriekšējiem pētījumiem, kas parāda, ka Ag1 + + EDTA/BC mērce uzlaboja ievainoto trušu ausu dziedināšanas parametrus in vivo. Tomēr tas var būt saistīts ar atšķirībām dzīvnieku modeļos, mērīšanas laikos un baktēriju pielietošanas metodēs29. Šajā gadījumā brūču mērījumus veica 12 dienas pēc traumas, lai garākā laika posmā būtu jārīkojas ar mērces aktīvajām sastāvdaļām. To atbalsta pētījums, kas parādīja, ka klīniski inficētās kāju čūlas, kas ārstētas ar AG1 + + EDTA/BC NEVIENOTIMICROBIULU LIETOŠANA. narkotikas. CMC pārsēju, lai samazinātu Ulcers30 lielumu.
Iepriekš ir pierādīts, ka noteiktas sudraba formas un koncentrācijas ir citotoksiskas 11. vitro, taču šie in vitro rezultāti ne vienmēr nozīmē nelabvēlīgu iedarbību in vivo. Turklāt sudraba tehnoloģijas sasniegumi un labāka sudraba savienojumu un mērču koncentrācijas izpratne ir izraisījusi daudzus drošus un efektīvus sudraba mērces. Tomēr, attīstoties sudraba ģērbšanās tehnoloģijai, ir svarīgi izprast šo pārsēju ietekmi uz brūču vidi31,32,33. Iepriekš tika ziņots, ka palielināts atkārtotas epitelializācijas ātrums atbilst palielinātam pretiekaisuma M2 makrofāgu īpatsvaram salīdzinājumā ar iekaisuma M1 fenotipu. Tas tika atzīmēts iepriekšējā peles modelī, kur sudraba hidrogela brūču pārsējus tika salīdzināti ar sudraba sulfadiazīna un ne antiimikrobiālo hidrogelu34.
Hroniskām brūcēm var būt pārmērīgs iekaisums, un ir novērots, ka pārmērīgu neitrofilu klātbūtne var kaitēt brūču sadzīšanai35. Pētījumā ar neitrofilu noplēsinātām pelēm neitrofilu klātbūtne aizkavēja reepitelializāciju. Pārmērīga neitrofilu klātbūtne noved pie augsta proteāžu un reaktīvo skābekļa sugu līmeņa, piemēram, superoksīda un ūdeņraža peroksīda, kas ir saistīti ar hroniskām un lēni dziedinošām brūcēm37,38. Tāpat makrofāgu skaita palielināšanās, ja tas nav nekontrolēts, var izraisīt aizkavētu brūču dziedināšanu39. Šis pieaugums ir īpaši svarīgs, ja makrofāgi nespēj pāriet no iekaisuma fenotipa uz pro dziedinošs fenotipu, kā rezultātā brūces neiziet no dziedināšanas iekaisuma fāzes40. Mēs novērojām neitrofilu un makrofāgu samazināšanos ar bioplēvi inficētās brūcēs pēc 3 dienu ārstēšanas ar visām sudraba mērcēm, bet samazinājums bija izteiktāks ar skābekļa sāls mērcēm. Šis samazinājums var būt tiešs imūnās reakcijas uz sudraba rezultāts, reakcija uz samazinātu bioburdeni vai brūce, kas atrodas vēlāk dziedināšanas stadijā un līdz ar to imūno šūnu samazināšanai. Samazinot iekaisuma šūnu skaitu brūcē, var uzturēt vidi, kas veicina brūču sadzīšanu. Nav skaidrs, kā Ag oksisalti veicina no infekcijas neatkarīgu dziedināšanu, bet Ag oksizaltu spēja radīt skābekli un iznīcināt kaitīgu ūdeņraža peroksīda līmeni, kas ir iekaisuma starpnieks, var to izskaidrot un prasa turpmāku pētījumu17.
Hroniskas nedziedinošas inficētās brūces rada problēmu gan ārstiem, gan pacientiem. Lai arī daudzi pārsējus apgalvo, ka pretmikrobu efektivitāte, pētījumi reti koncentrējas uz citiem galvenajiem faktoriem, kas ietekmē brūces mikrovidi. Šis pētījums parāda, ka dažādām sudraba tehnoloģijām ir atšķirīga pretmikrobu efektivitāte un, kas ir svarīgi, atšķirīga ietekme uz brūču vidi un dziedināšanu, neatkarīgi no infekcijas. Lai gan šie in vitro un in vivo pētījumi parāda šo pārsēju efektivitāti, ārstējot brūču infekcijas un veicinot dziedināšanu, ir nepieciešami randomizēti kontrolēti pētījumi, lai novērtētu šo pārsēju efektivitāti klīnikā.
Pašreizējā pētījuma laikā izmantotās un/vai analizētās datu kopas ir pieejamas no attiecīgā autora pēc saprātīga pieprasījuma.
Pasta laiks: jūlijs-15-2024